制胶;在两块制胶玻璃板中间放上垫片,放上制胶架,拧紧制胶螺丝夹紧玻璃板.制备适量适合浓度的凝胶,使之略多于胶板.差异浓度聚丙酰胺凝胶的制法:在参与TEMED以及10%过硫酸铵后.
立刻混匀,倒入安放45℃角的玻璃板内,实足注满,快速将玻璃板安放水平地址.立刻放成型梳子于腔顶并夹紧,待30-60分钟胶聚拢后,取下胶板,纳入电泳槽中不变.
加样以及电泳;高低槽中参与1×TBE电泳缓冲液,溢过加样孔,拔出梳子,排除加样孔中的气泡,将PCR产品或限制性内切酶消化产品2与1上样缓冲液混匀,用微量注射器参与加样孔底部,使样品在孔底成一层,两旁孔中参与准则分子量的DNA Marker,以2-10V/cm电压电泳,电泳时光充足长,使片段足以分离,待指示剂走到合适地址时关上电源,将胶片掏出.
银染;分离两块玻璃板,将凝胶片纳入100ml银染不变液中振荡15min,双蒸水洗3次,每次2min,而后将凝胶片转入100ml 0.2%的AgNO3中于摇床上染色约10min,吸去AgNO3液,用双蒸水洗3次,每次30s,参与100ml显色液约7-10min,待DNA带显现消除时,吸去显色液,参与不变液Na2CO3,静置2-3min,掏出凝胶观看.